Luận án Nghiên cứu tổng hợp hệ Nano Dendrimer Poly (Amidoamine) mang thuốc chống ung thư (Carboplatin và Oxaliplatin)

ng rn, màu trng. 
Bng 2.3 tóm tt khi lng tác cht s dng tng hp G4.0-PEG. 
Bng 2.3. Khi lng tác cht s dng tng hp G4.0-PEG 
STT T l 
G4.0 : mPEG-NPC 
(theo s mol) 
mG4.0 
(g) 
mdd G4.0 3% 
(g) 
mPEG-NPC 
(g) 
1 1 : 04 0,41 13,78 0,60 
2 1 : 08 0,26 8,69 0,76 
3 1 : 16 0,15 4,99 0,87 
4 1 : 32 0,08 2,70 0,94 
2.5. Nang hóa thuc oxaliplatin và carboplatin bng PAMAM-PEG 
T l thuc platin : PAMAM – PEG = 1:10 (w/w). 
48 
Cân chính xác thuc platin hòa tan trong 5 ml nc. Thuc c khuy u trong 
1 gi  m bo thuc tan hoàn toàn, c dung dch (1). Cân PAMAM-PEG gp 10 
ln khi lng thuc platin và hòa tan trong 10 ml nc, khuy u trong 10 phút, c 
dung dch (2). Cho t t dung dch (1) vào dung dch (2), tip tc khuy hn hp trong 
24 gi  nhit  phòng. 
Hn hp sau ó c cho vào màng MWCO = 3.500 Da, thêm 25 ml nc và 
tin hành thm tách trong 1 gi, thay nc, lp li 4 ln. Tng dung dch ngoài màng 
c gp chung và em o HPLC  xác nh lng thuc t do. Dung dch trong màng 
c ông khô chân không và thu sn phm rn. 
Khi lng thuc platin dùng cho G3.0-PEG là 10,47 mg carboplatin và 10,26 
mg oxaliplatin; dùng cho G3.5-PEG là 10,12 mg carboplatin và 8,26 mg oxaliplatin và 
dùng cho G4.0-PEG là 10,08 mg carboplatin và 8,56 mg oxaliplatin. 
2.6. Phóng thích thuc chm 
Cân chính xác 5,0 mg PAMAM-PEG mang thuc platin hòa tan trong 2,500 ml 
nc. Dung dch c cho vào màng MWCO = 3,5 kDa, thêm 7,500 ml dung dch m 
PBS, khuy t  50 rpm. 
Sau mi 1; 3; 6; 12; 24 gi ly ra 1,000 ml dung dch ngoài màng  o HPLC, 
ng thi b sung 1,000 ml dung dch m PBS. 
2.7. Kho sát  tng hp sinh hc và  c t bào ca h cht mang thuc 
 tng hp sinh hc trên t bào c thc hin trên t bào L929. 
Các mu o bao gm: PAMAM G3.0 và G3.0 gn PEG các t l; PAMAM G3.5 
và G3.5 gn PEG các t l; PAMAM G4.0 và G4.0 gn PEG các t l 
 c t bào ca h cht mang thuc c thc hin trên t bào HeLa, MCF-7 
và A549. 
Các mu o bao gm: Carboplatin chun, Oxapliplatin chun và PAMAM G3.0-
PEG, G3.5-PEG, G4.0-PEG mang thuc carboplatin, oxaliplatin. 
2.7.1. Pha thuc 
2.7.1.1. Kho sát  tng hp sinh hc trên dòng t bào L929 
Ngày 0 (trc ngày tri t bào lên a 1 ngày): cân các cht cn th nghim  
tng thích sinh hc vào các ng ly tâm nh eppendorf, cho vào mi ng ly tâm nh 
49 
eppendorf mt lng môi trng nuôi t bào sao cho nng  cht th là 1 mg/ml, trn 
k bng pipette. Sau ó mi ng ly tâm nh eppendorf c ánh siêu âm vortex trong 
1 phút  tc  2.000 vòng/phút. Cui cùng ng ly tâm nh eppendorf c ánh siêu 
âm  37ºC trong 20 phút, sau ó   qua êm trong t  t bào  iu kin 37ºC, 5% 
CO2,  m 98%. 
Ngày 1: pha loãng mi mu cht th xung các nng  500 và 250 µg/ml bng 
môi trng nuôi t bào. Sau ó   qua êm trong t  t bào  iu kin 37ºC, 5% 
CO2,  m 98%. 
2.7.1.2. Kho sát  c trên các dòng t bào ung th 
Ngày 0 (trc ngày tri t bào lên a 1 ngày): cân các mu thuc vào các ng ly 
tâm nh eppendorf sao cho lng thuc trong mi mu là 1 mg, cho vào mi ng ly tâm 
nh eppendorf 1 ml môi trng nuôi t bào và trn k bng pipette. Sau ó mi ng ly 
tâm nh eppendorf c vortex trong 1 phút  tc  2000 vòng/phút. Cui cùng các 
ng ly tâm nh eppendorf c ánh siêu âm  37ºC trong 20 phút, sau ó   qua êm 
trong t  t bào  iu kin 37ºC, 5% CO2,  m 98%. 
Ngày 1: pha loãng mi mu thuc xung các nng  100, 75, 50, 25, 10 µg/ml 
bng môi trng nuôi t bào. Sau ó   qua êm trong t  t bào  iu kin 37ºC, 
5% CO2,  m 98%. 
2.7.2. Nuôi cy t bào 
T bào s dng là dòng nguyên bào si fibroblast và 3 dòng t bào ung th (ung 
th vú MCF-7, ung th phi A549 và ung th t cung Hela) c nuôi trong môi trng 
Dulbecco’s modified Eagle’s medium (Gibco, Invitrogen) b sung 10% huyt thanh bò 
(fetal bovine serum, Gibco) và 1% kháng sinh (penicillin/streptomycin, Gibco). 
Ngày 1: t bào khi t 90% mt  c thu bng trypsin/EDTA và quay li tâm 
 tc  1300 vòng/phút trong 5 phút. Sau ó t bào c pha loãng xung nng  
1.5x105/ml. Cho 100 µl dung dch cha t bào  trên vào mi ging ca a 96 ging. 
Ngày 2: rút b môi trng c trong mi ging và thay bng 100 µl dung dch 
thuc ã pha sn ti các nng  100, 75, 50, 25, 10 µg/ml ca mi mu hoc môi trng 
nuôi t bào nguyên cht không cha thuc (mu control). Mi nng  ca tng mu 
thuc lp li 3 ln. Thi gian quan sát tng tác thuc và t bào là 24 gi và 48 gi. 
50 
2.7.3. Th nghim  c 
Kim tra c tính bng phng pháp s dng resazurin 
Ngày 3: sau 24 gi, quan sát s lng và hình thái t bào ti tng nng  ca 
mi mu di kính hin vi. 
Cho 10 µl dung dch resazurin (0.2 mg/ml) vào tng ging.  a trong t nuôi t 
bào  iu kin 37ºC, 5% CO2,  m 98% trong 4 gi ri em i phân tích nh lng 
s t bào sng bng máy c a  bc song hunh quang lEx = 560 nm và lEm = 590 
nm. 
Ngày 4: sau 48 gi, lp li các bc nh ngày 3. 
2.7.4. Nhum màu t bào sng/cht (live/dead stain) 
Dung dch nhum cha 10 mM fluorescein diacetate (FdA) và 7.5 mM ethidium 
bromide (EB) c chun b bng cách pha loãng bt FdA và EB vi PBS trc khi s 
dng. Toàn b quy trình nhum c thc hin trong phòng ti  tránh gim hiu qu 
ca thuc nhum hunh quang. Vi mi ging cy t bào, hút b môi trng c và ra 
vi PBS nhiu ln. Sau khi hút b PBS, s dng 25 µL dung dch nhum ph kín b mt 
ging cy và  trong 3 phút. Ra sch thuc nhum vi PBS. Quan sát mu sau khi   
bc sóng kích thích  = 485 nm cho FdA và  = 530 nm cho EB vi kính hin vi hunh 
quang. 
2.8. ng chun nh lng carboplatin và oxaliplatin bng HPLC 
ng chun nh lng carboplatin c xây dng bng phng pháp HPLC 
vi chng trình nh sau: Ct sc ký: silica pha o C18, dài 15 cm; H pha ng: nc; 
Tc  dòng: 2 ml/phút; Thi gian: 6 phút; Nhit : 25ºC. 
ng chun nh lng oxaliplatin c xây dng bng phng pháp HPLC 
vi chng trình nh sau: Ct sc ký: silica pha o C18, dài 15 cm; H pha ng: 
metanol – nc t l 1:1; Tc  dòng: 1 ml/phút; Thi gian: 4 phút; Nhit : 25ºC. 
51 
CHNG 3. KT QU VÀ THO LUN 
3.1. Tng hp PAMAM dendrimer n th h G4.0 
3.1.1. Tng hp PAMAM dendrimer n th h G2.5 
3.1.1.1. Ph cng hng t ht nhân (1H-NMR) 
Ph 1H-NMR ca các PAMAM dendrimer t G-0.5 n G2.5 (Hình 3.1, Hình 
3.2, Hình 3.3 và Hình 3.4) c nghiên cu tng hp có nhng proton vi  chuyn 
dch hóa hc in hình nh các công trình ã công b [40, 46, 53, 93-96]. 
Ph 1H-NMR ca PAMAM dendrimer t G-0.5 n G2.5 u có các proton vi 
 chuyn dch hóa hc in hình: -CH2CH2N< (a) ti H = 2,6 ppm; -CH2CH2CO- (b) 
ti H = 2,8-2,9 ppm; -CH2CH2CONH- (c) ti H = 2,3-2,4 ppm; -CH2CH2NH2 (d) ti 
H = 2,7- 2,8 ppm; -CONHCH2CH2N- (e) ti H = 3,2-3,4 ppm; -CH2CH2COOCH3- 
(g) ti H = 2,4-2,5 ppm và -COOCH3 (h) ti H = 3,7 ppm. 
Hình 3.1. Ph 1H-NMR ca PAMAM G-0.5 (trái) và G0.0 (phi) 
Hình 3.2. Ph 1H-NMR ca PAMAM G0.5 (trái) và G1.0 (phi) 
52 
Hình 3.3. Ph 1H-NMR ca PAMAM G1.5 (trái) và G2.0 (phi) 
Hình 3.4. Ph 1H-NMR ca PAMAM G2.5 
iu này minh chng cho cu trúc các sn phm PAMAM dendrimer t G-0.5 
n G2.5 là úng và phù hp vi cu to theo lý thuyt. 
3.1.1.2. Ph khi lng (MS) 
Ph khi lng PAMAM dendrimer t G-0.5 n G1.5 theo Hình 3.5, 3.6 và 3.7. 
Hình 3.5. Ph MS ca PAMAM G-0.5 (trái) và G0.0 (phi) 
53 
Hình 3.6. Ph MS ca PAMAM G0.5 (trái) và G1.0 (phi) 
Hình 3.7. Ph MS ca PAMAM G1.5 
So sánh khi lng phân t ca các PAMAM dendrimer tng hp vi lý thuyt 
cho thy h s sai lch trung bình là 0,09% (chi tit theo Bng 3.1). 
Bng 3.1. Khi lng phân t ca các PAMAM dendrimer tng hp vi lý thuyt 
Th h 
PAMAM 
Khi ph 
(m/z) 
Khi lng phân t 
theo lý thuyt (m/z) 
H s sai lch 
(%) 
G-0.5 405,2015 404,45 0,18
G0.0 517.3634 516,68 0,13
G0.5 1205,6128 1.205,39 0,02
G1.0 1429,9832 1.429,85 0,01
G1.5 2806,4371 2.807,28 0,03
PAMAM dendrimer G2.0 tr lên không xác nh c giá tr m/z. iu này c 
công b trong các kt qu nghiên cu ca Schwartz và Hood [95, 97]. 
Nguyên nhân ca vic không xác nh c khi lng phân t ca PAMAM th 
h cao trc ht có th là do các PAMAM này khó có kh nng t c giá tr lý thuyt 
do hiu ng lp th [98]. 
54 
Trong s các phng pháp có th s dng  xác nh trng lng phân t ca 
dendrimers nh MALDI-TOFMS, quang ph khi ion hóa ion dng ESI-MS và thm 
thu gel sc ký GPC thì quang ph khi ch có th áp dng i vi dendrimer có trng 
lng phân t di 8.000 Da, tng ng vi PAMAM dendrimer th h di G3.0. Tuy 
nhiên, quang ph khi ca PAMAM dendrimer G2.0 và G2.5 là rt phc tp [99,100]. 
Trng hp áp dng GPC thì òi hi mt s iu kin nghiêm ngt  thc hin nh h 
dung môi s dng cho pha ng là h m vi pH cao (pH=11), nhit  ct thích hp 
cng nh loi ct tng thích [101-103], trong khi kt qu thng cho  a phân tán 
cao [104-106]. Mt khác, 1H-NMR li cho thy ây là k thut hu ích  nghiên cu 
trng lng phân t và i vi PAMAM dendrimer, vic s dng ph 1H-NMR  xác 
nh trng lng phân t có  chính xác tng i cao [92]. 
Ph cng hng t ht nhân 1H-NMR và ph khi lng (MS) ã chng minh 
c sn phm PAMAM dendrimer có cu trúc úng theo lý thuyt. 
3.1.2. Tng hp PAMAM dendrimer th h G3.0, G3.5 và G4.0 
Sn phm tng hp c  trng thái cht rn màu vàng, hút m mnh, d tan 
trong nc và metanol. Trong ó PAMAM G3.5 m màu hn PAMAM G3.0 và 
PAMAM G4.0. Hình nh các sn phm PAMAM dendrimer th h G3.0, G3.5 và G4.0 
c trình bày trong Ph lc 1. 
Cu trúc sn phm PAMAM G3.0, G3.5 và G4.0 xác nh vi ph t ngoi – kh 
kin (UV-Vis), ph hng ngoi (FT-IR), ph cng hng t ht nhân 1H-NMR. Kt qu 
ph c trình bày trong Ph lc 2. Bên cnh ó, d liu ph 1H-NMR c dùng  
tính toán khi lng phân t PAMAM G3.0, G3.5 và G4.0. 
Hình thái kích thc ht c kho sát bng kính hin vi in t truyn qua TEM, 
tán x ánh sáng ng DLS và o th zeta. Kt qu TEM, DLS và th zeta c trình bày 
trong Ph lc 3. 
3.1.2.1. Ph t ngoi – kh kin (UV-Vis), ph hng ngoi (FT-IR) và ph cng 
hng t ht nhân (1H-NMR) 
Ph hp th UV-Vis ca PAMAM G3.0, G3.5 và G4.0 có vân hp th c trng 
 bc sóng 280 – 285 nm, tng ng vi di hp th ca nhóm amin bc 3 trong cu 
55 
trúc ca PAMAM dendrimer G3.0, G3.5 và G4.0 [107-109]. Các PAMAM có nhiu 
nhóm amin bc 3 hn nh PAMAM G3.5 th hin cng  hp th mnh hn. 
Ph FT-IR các sn phm PAMAM dendrimer G3.0, G3.5 và G4.0 trong khong 
t 4.000 cm-1 n 500 cm-1 thì PAMAM G3.0 và PAMAM G4.0 có tín hiu ti 3.410 – 
3.265 cm-1 ca nhóm amin bc 2 (-NH-); 1.652 – 1.645 cm-1 ca C=O (liên kt amid) 
và 1.556-1.552 cm-1 là dao ng bin dng ca liên kt N-H. 
Bên cnh ó PAMAM G3.5 có các vân hp th ca nhóm –OH trên axit 
cacboxylic b mt ti 3.415 – 3.265 cm-1, các vân hp th ti 1.730 cm-1 ca nhóm C=O 
(axit). ây u là tín hiu ph hng ngoi in hình ca PAMAM dendrimer G3.0, G3.5 
và G4.0 [109, 110]. 
Ph 1H-NMR (Bng 3.4, Hình 3.8 và Hình 3.9) cho thy các tín hiu c trng 
ca PAMAM G3.0, G3.5 và G4.0 [80, 111-113]. 
Bng 3.2. Các tín hiu c trng trên ph 1H-NMR ca PAMAM G3.0, G3.5 và G4.0 
n v tính: H (ppm) 
PAMAM (a) (b) (c) (d) (e) (f) 
G3.0 2,80-2,83 2,37-2,40 2,60-2,61 3,26-3,30 2,73-2,76 
G3.5 2,78-2,85 2,39-2,42 2,57-2,63 3,27-3,37 2,47-2,50 3,69-3,73 
G4.0 2,83-3,00 3,20-3,28 2,73-2,83 3,56-3,70 3,28-3,37 
Hình 3.8. Ph 1H-NMR ca PAMAM G3.0 (trái) và PAMAM G3.5 (phi) 
56 
Hình 3.9. Ph 1H-NMR ca PAMAM G4.0 
T ph cng hng t ht nhân (1H-NMR), ph hng ngoi (FT-IR) và ph t 
ngoi – kh kin (UV-Vis) có th khng nh cu trúc ca PAMAM dendrimer các th 
h G 3.0, G3.5 và G 4.0 ã c tng hp thành công. 
3.1.2.2. Tính toán khi lng phân t PAMAM bng 1H-NMR 
Khi lng phân t c tính da vào giá tr tích phân ca tín hiu (c) và (d) ca 
PAMAM G3.0, (a) và (d) ca PAMAM G3.5 và PAMAM G4.0 trên ph 1H-NMR ng 
vi s proton  v trí c trng ca phân t PAMAM G3.0 G3.5 và G4.0 [92]. 
Công thc tính khi lng phân t ca PAMAM G3.0 nh sau: 
MNMR=

NMR

LT
.MLT=
 H(d)
 H(c)
 H(d)
 H(c)
.MLT=
1,923
1,018
120
60
.6.909=6.526 
Công thc tính khi lng phân t ca PAMAM G3.5 nh sau: 
MNMR=

NMR

LT
.MLT=
 H(d)
 H(a)
 H(d)
 H(a)
.MLT=
1,996
2,264
120
124
.12.489=11.378 
Công thc tính khi lng phân t ca PAMAM G4.0 nh sau: 
MNMR=

NMR

LT
.MLT=
 H(d)
 H(a)
 H(d)
 H(a)
.MLT=
6,76
3,95
120
60
.14215=12163 
57 
Trong ó: 
- MNMR: khi lng phân t tính bng ph NMR 
- MLT: khi lng phân t tính theo lý thuyt 
- NMR: t l tích phân ca 2 tính hiu trên ph NMR 
- LT: t l gia s proton  2 v trí c trng ca phân t PAMAM 
- ∫H: tích phân ca tín hiu trên ph NMR 
- ∑H: tng s proton  v trí c trng ca phân t PAMAM 
Khi lng phân t tính toán c ca PAMAM G3.0 G3.5 và G4.0 sai lch so 
vi lý thuyt ln lt là 5,54%, 8,90% và 14,44%. Kt qu này ng thi phù hp vi 
hiu sut phn ng (90%) ã tính toán nêu trên. 
3.1.2.3. Hình thái PAMAM 
Kt qu o kích thc ht bng phng pháp kính hin vi in t truyn qua 
(TEM) và tán x ánh sáng ng (DLS) cho thy các ht PAMAM dendrimer có dng 
hình cu,  ng u cao và các ht u không quá 10 nm. 
Bng 3.3. Kích thc ht trung bình ca PAMAM G3.0, G3.5, G4.0 
PAMAM DLS (nm) TEM (nm) 
G3.0 5,9 ± 1,1 3,09 ± 0,02 
G3.5 6,6 ± 1,8 5,68 ± 0,06 
G4.0 3,9 ± 0,1 4,04 ± 0,05 
nh TEM và biu  phân b kích thc ht ca PAMAM G3.0, G3.5 và G4.0 
c trình bày trong Hình 3.10, Hình 3.11 và Hình 3.12). 
Hình 3.10. nh TEM và thng kê kích thc ht ca G3.0. 
58 
Hình 3.11. nh TEM và thng kê kích thc ht ca PAMAM G3.5. 
Hình 3.12. nh TEM và thng kê kích thc ht ca PAMAM G4.0 
Kích thc ht trung bình ca PAMAM G3.0 nh hn PAMAM G3.5 phù hp 
vi lý thuyt, cho thy khi s tng kích thc ca các PAMAM th h sau so vi th h 
trc. 
Tuy nhiên PAMAM G4.0 có kích thc nh hn PAMAM G3.5 có th vì cùng 
s lng là 64 nhóm b mt nhng khác nhóm chc (PAMAM G4.0 là amin và PAMAM 
G3.5 là cacboxylat) nên PAMAM G4.0 có hin tng np gp ngc do lc hp dn 
gia các nhóm chc b mt gim, kéo theo  trt t thp các nhánh dendrimer s gp 
vào trong khin cu trúc dendrimer b co li, làm gim không gian bên trong ca 
dendrimer. Hin tng này c De Gennes và Hervet công b [42]. 
Ngoài ra PAMAM G3.5 b trng n nh các nhóm cacboxylat tng tác vi 
nc nên kích thc DLS ca PAMAM G3.5 ln hn PAMAM G4.0. 
59 
3.1.2.4. Th zeta 
Th zeta trung bình PAMAM dendrimer G 3.0 là 44,63 ± 0,31 mV, PAMAM 
dendrimer G 3.5 là -48,7 ± 0,1 mV và PAMAM dendrimer G 4.0 là 24,13 ± 0,15 mV. 
Kt qu này phù hp vi lý thuyt và minh chng cho s tng hp thành công 
PAMAM G3.0, G3.5 và G4.0. C th, PAMAM th h chn G3.0 và G4.0 vi nhóm 
amin b mt mang in tích dng có th zeta dng in và PAMAM th h l G3.5 
vi nhóm cacboxylat mang in tích âm có th zeta âm in. Bên cnh ó, PAMAM 
G4.0 có nhiu nhóm amin hn PAMAM G3.0 (64 nhóm so vi 32 nhóm) và do hin 
tng np gp ngc nên có th zeta ít dng in hn do các nhóm amin co li vào 
trong. Kt qu o th zeta còn cho thy h có  bn cao (th zeta trên 20 mV hoc di 
-20mV). 
Nguyên nhân do các lc y tnh in cùng vi cu to h hình cu theo mô hình 
lý thuyt ca DLVO (theo tên các nhà khoa hc nghiên cu mô hình này là Derjaguin, 
Landau, Verwey và Overbeek) [114 – 120]. 
3.1.3. Hiu sut phn ng tng hp PAMAM dendrimer 
Các s liu và hiu sut ca phn ng tng hp PAMAM dendrimer G-0.5 n 
G4.0 chi tit theo Bng 3.2. 
Bng 3.4. Hiu sut ca phn ng tng hp PAMAM dendrimer 
Th h 
PAMAM 
Phân t 
lng (g/mol) 
S mol Khi lng lý 
thuyt (mLT, g) 
Khi lng 
thc (mTT, g)
Hiu sut 
(%) 
G-0.5 404,4554 0,0825 33,3676 29,1547 87 
G0.0 516,6815 0,0497 25,6791 21,0378 81 
G0.5 1205,3950 0,0407 49,0596 41,2859 84 
G1.0 1429,8480 0,0177 25,3083 22,2346 87 
G1.5 2807,2760 0,0155 43,5128 40,0328 92 
G2.0 3256,1800 0,0143 46,5634 43,2905 92 
G2.5 6011,0360 0,0133 79,9468 73,4406 91 
G3.0 6908,8452 0,0061 42,2590 37,7565 89 
G3.5 12418,5566 0,0055 67,8653 61,7586 91 
G4.0 14214,1751 0,0025 35,3382 30,6938 87 
60 
Hiu sut ca phn ng tng hp PAMAM dendrimer n th h G4.0 c tính 
theo công thc là t l khi lng sn phm thc t so vi khi lng sn phm theo lý 
thuyt. Ví d PAMAM dendrimer có s mol tham gia phn ng là 0,0143 mol và phân 
t lng là 3.256 g/mol nên khi lng lý thuyt là 46,5634 g; so vi khi lng thc 
t thu c là 43,2905 g. Vì vy hiu sut phn ng tng hp PAMAM dendrimer G2.0 
là 43,2905 g / 46,5634 g, tng ng 92,97%. 
Nhìn chung, hiu sut ca các phn ng tng hp PAMAM dendrimer t G-0.5 
n G4.0 khá cao, trên 70 %. 
3.2. Bin tính PAMAM dendrimer bng mPEG 
Theo nhiu kt qu nghiên cu ã công b thì mPEG bin tính vi PAMAM các 
th h G3.0, G3.5 hay G4.0 có khi lng phân t trong khong t 4.000 Da n 5.000 
Da là phù hp trong các kho sát làm h mang thuc vì khi lng phân t nh hn s 
không hiu qu trong mc ích che ph b mt amin c tính ca PAMAM th h chn 
còn khi lng phân t ln hn thì s làm cho mPEG cng knh và có hiu ng lp th 
dn n khó khn trong quá trình tng hp [80]. 
Bên cnh ó, nghiên cu s dng mPEG là PEG ã c metoxy hóa  mt nhánh 
và nhánh còn li là glycol  lai hóa vi b mt PAMAM. iu này m bo không có 
hin tng cùng mt phân t mPEG s lai hóa vi 2 PAMAM  hai nhánh glycol ca 
mình và sn phm thu c là ng nht nh mc ích nghiên cu ã t ra. 
Ngoài ra, nhm to phn ng kt hp tt hn gia mPEG vi nhóm amin b mt 
ca các dendrimer PAMAM thì mPEG c hot hóa trc khi phn ng. Do nhóm 
chc b mt ca PAMAM th h chn và th h l là khác nhau nên mPEG hot hóa vi 
NPC  phn ng vi PAMAM th h chn G3.0 và G4.0 thông qua các liên kt uretan. 
Trong khi ó, phn ng ca PAMAM th h l G3.5 vi mPEG hot hóa vi NH2. 
Hình nh các sn phm mPEG-NPC, mPEG- NH2, PAMAM-PEG c trình bày 
trong Ph lc 1. 
Sn phm mPEG-NPC thu c  trng thái cht rn màu trng, dng bt mn, 
tan tt trong nc và có màu vàng khi pH dung dch ln hn 7; mPEG- NH2 là cht rn 
dng xp màu trng, tan tt trong nc. 
61 
PAMAM-PEG  trng thái cht rn, màu trng, dng xp, d tan trong nc; 
PAMAM G3.5-PEG và PAMAM G4.0-PEG màu ngà hn so vi PAMAM G3.0-PEG. 
Cu trúc sn phm PAMAM-PEG G3.0, G3.5 và G4.0 xác nh vi ph t ngoi 
– kh kin (UV-Vis), ph hng ngoi (FT-IR), ph cng hng t ht nhân 1H-NMR. 
Kt qu ph c trình bày trong Ph lc 4. 
Hình thái kích thc ht c kho sát bng kính hin vi in t truyn qua TEM, 
tán x ánh sáng ng DLS và o th zeta. Kt qu TEM, DLS và th zeta c trình bày 
trong Ph lc 5. 
3.2.1. Ph t ngoi – kh kin (UV-Vis) 
Ph UV-Vis (Hình 3.13) cho thy sn phm PAMAM G 3.0-PEG, G4.0-PEG có 
tín hiu ti khong 280 – 285 nm st gim (ây là di hp th c trng ca nhóm amin 
bc 3 trong cu trúc ca PAMAM dendrimer G 3.0, G 4.0). Hin tng này có th là do 
có s tn ti các phân t PEG (PEG có di hp th  vùng 280 – 285 nm thp). 
Hình 3.13. Ph UV-Vis ca PAMAM và PAMAM-PEG th h G3.5 và G4.0 
So sánh ph UV-Vis ca PAMAM G3.5 và PAMAM G3.5-PEG cho thy khong 
tín hiu c trng ca PAMAM G3.5 trong khong bc sóng 280 – 285 nm gn nh 
bin